运用2D-DIGE技术的结直肠癌差异蛋白质组学研究

目的:以荧光标记的二维差异凝胶电泳( 2D-DIGE)等蛋白质组学技术分析结直肠癌(CRC)与正常结肠黏膜间的蛋白质表达差异,筛选新的肿瘤标志物.方法:以2D-DIGE及基质辅助激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析和鉴定6对新鲜的CRC与正常大肠黏膜组织的差异表达蛋白;以免疫组化法验证兴趣蛋白在46例CRC与正常大肠黏膜组织中的表达.结果:2D-DIGE分析和MALDI-TOF-MS鉴定结果显示,在CRC组织中表达明显升高的蛋白有泛醌细胞色素C还原酶核心蛋白1( UQCRCl),14-3-3ζ和结蛋白(desmin)等,明显降低的蛋白有碳酸酐酶(CA)Ⅰ和CA Ⅱ(均P＜0.05).免疫组化法结果显示,UQCRC1和14-3-3ζ在CRC中的表达强度为2.43 ±0.81和1.41±1.07,明显高于两者正常黏膜中的表达(1.80 ±0.96,0.67±0.94)(P＜0.001),而desmin在两组织间表达差异无统计学意义(P＞0.05);CA Ⅰ及CA Ⅱ在CRC中的表达强度为1.67±0.52和1.18±0.84,明显低于两者在正常黏膜中的表达强度(2.93±0.25,2.80±0.50) (P＜0.001).结论:以2D-DIGE为基础的蛋白组学技术结合免疫组化等方法验证是筛选肿瘤标志物的有效手段.UQCRC1,14-3-3ζ,CA Ⅰ和CA Ⅱ可能为CRC新的标志物或治疗靶点.     

抑癌基因WTX在结肠癌中的表达及其意义

目的:探讨抑癌基因WTX在结肠癌组织中的表达水平及其意义.方法:收集经病理学证实的50例结肠癌患者的癌组织及其癌旁组织与远癌组织标本,应用荧光定量PCR( qPCR)及Western blot法检测各组织WTX基因及蛋白的表达水平.结果:相对于远癌组织(1.00±0.00),癌组织与癌旁组织WTX基因表达量分别为0.36±0.17和0.91±0.34,各组织间差异均有统计学意义(均P＜0.05).WTX蛋白的相对表达量在癌组织,癌旁组织,远癌组织分别为0.27±0.11,0.64±0.23,0.72±0.19,各组织间差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:抑癌基因WTX的表达降低可能在结肠癌的发生发展进程中起重要作用.     

平片无张力修补术治疗成人脐疝28例临床体会

目的 探讨平片无张力修补术在治疗成人脐疝中的临床应用价值.方法 回顾分析28例平片无张力修补成人脐疝的病例,观察手术时间、住院时间,随访观察术后并发症及复发情况.结果 全部病例均获得成功,手术时间平均65min,平均住院时间6.5d.术后随访6个月～3年,无复发病例.结论 平片无张力修补术是治疗成人脐疝的一种有效而可靠的术式,具有手术操作安全、并发症少、复发率低等优点.     

结直肠癌K-ras基因突变位点的检测及其临床意义

目的:探讨结直肠癌中K-ras基因突变状态及其与临床病理特征的关系.方法:应用实时荧光定量PCR( RT-qPCR)和直接基因测序法检测200例结直肠癌患者癌组织K-ras基因突变状态.将两种检测结果进行对比,并结合临床病理资料分析其意义.结果:200例结直肠癌患者中,RT-qPCR检测出突变63例,突变检出率31.5％;经直接基因测序,测序成功的样品169例,检出突变50例,突变检出率29.6％.其中第12密码子GGT→GAT最常见,占34.9％( 22/63);其次是第13密码子GGC→GAC,占28.6％(18/63);第12密码子GGT→CGT最少,全组未见(0/63).两种方法突变检测一致率为98％.K-ras基因突变与肿瘤分化程度有关( P＜0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤部位、淋巴结转移及TNM分期无明显关系(均P＞0.05).结论:RT-qPCR能快速、敏感、准确地检测结直肠癌K-ras基因突变位点,为临床靶向治疗提供可靠的参考依据.     

肝动脉栓塞化疗前后血管内皮细胞相关细胞因子的变化

目的 与手术切除比较,明确肝细胞癌肝动脉栓塞化疗(TACE)前、后血管内皮细胞生长相关细胞因子含量变化.方法 手术切除组30例,TACE组30例.利用生物蛋白芯片技术检测血清中多种细胞因子的含量.结果 治疗前两组患者血管内皮相关细胞因子含量无显著差异.治疗后两组患者血清促血管内皮细胞生长因子显著下降,抑制血管内皮细胞生长因子显著升高.肝细胞癌患者行TACE治疗后血清中细胞因子IL-6、IL-8、VEGF和EGF的含量(分别为94.57±20.23、52.17±7.78、165.05±28.65、53.49±9.73 pg/ml)明显高于手术切除组(分别为67.27±20.08、23.48±9.16、128.37±43.43、70.96±13.88 pg/ml),P＜0.01;而细胞因子IL-10、IFNγ和TNFα的含量(分别为0.82±0.31、1.02±0.22、8.80±2.87 pg/ml)明显低于手术切除组(分别为1.09±0.29、1.57±0.31、6.97±1.54 pg/ml),P＜0.01.结论 TACE治疗后患者血清促进血管内皮细胞生长的细胞因子含量明显高于手术切除组;而抑制血管内皮细胞生长的细胞因子含量明显低于手术切除组.肝细胞癌根治性手术切除对肿瘤血管内皮细胞生成因子的抑制作用明显好于TACE治疗的抑制作用.     

TAD值在INTERTAN髓内钉治疗骨质疏松性股骨粗隆间骨折中的应用价值

目的探讨TAD值（Tip Apex Distance,尖顶距值）在第四代股骨近端联合交锁髓内钉 (INTERTAN钉）治疗老年骨质疏松性股骨粗隆间骨折中的应用价值。方法 回顾分析2010年1月~2011年12月,应用INTERTAN钉并遵循“尖顶距”原理放置拉力钉治疗股骨粗隆间骨折16例。骨折按内固定研究协会/美国骨创伤协会（A0/0TA)分型标准：31-A1型1例,31-A2型12例,31-A3型 3例。结果 全部病例获得5~18月的随访,平均8.5月,按J0A髋关节评分系统评定：优10例,良4例,可2例,优良率为87. 5%。结论 新一代股骨近端髓内钉INTERTAN治疗老年骨质疏松性股骨粗 隆间骨折并按TAD原理放置拉力螺钉,固定可靠,骨折愈合率高,临床疗效满意,能有效减少拉力螺钉切出等并发症。     

矢车菊素-3-葡萄糖苷诱导人胃癌细胞株SGC7901凋亡及其机制

目的 观察矢车菊素-3-葡萄糖苷(C3G)在体外诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡的生物学效应,并初步探讨其分子机制.方法 分别采用不同浓度梯度的C3G处理SGC7901胃癌细胞,MTT比色法检测细胞生长率;激光共聚焦显微镜观察细胞形态改变;TUNEL法分析细胞凋亡率;Western blot法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3、ICAD蛋白表达的情况.结果 C3G在体外能明显抑制人胃癌SGC7901细胞的生长增殖,且呈浓度、时间依赖性(P＜0.01).激光共聚焦显微镜下可见Hoechst33258荧光染色细胞呈凋亡特征性改变;TUNEL法检测实验组细胞凋亡率均明显高于阴性对照组(P＜0.01);C3G可下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,降低Bcl-2/Bax蛋白的比值,促使Caspase-3酶原蛋白活化,下调ICAD蛋白表达(P＜0.01).结论 C3G具有在体外抑制胃癌细胞增殖的作用,并能诱导其凋亡,其机制可能与Bcl-2/Bax降低导致Caspase-3活化、ICAD蛋白表达下降相关.     

急性颈脊髓损伤低蛋白血症的临床特点及治疗

目的探讨急性颈脊髓损伤低蛋白血症的临床特点及有效治疗措施。方法回顾性分析2004年9月～2012年1月收治的335例急性颈脊髓损伤患者,其中未行气管切开187例（A组）,行气管切开148例（B组）。分析患者入院至出院前白蛋白指标的变化特点。患者入院后即采用静脉三升袋营养配合胃管鼻饲,每周行2次白蛋白检测,根据所测指标调整营养成份及剂量,对于A组伴有呼吸机辅助呼吸的患者,可同时以人血白蛋白静滴,能自主进食鼓励加强饮食;加强抗感染及水电解质平衡治疗。对比分析2组白蛋白变化趋势及在入院时、入院后每3d的血清白蛋白含量;对2组白蛋白指标差异及白蛋白静滴例数对比进行统计分析。结果入院时2组间差异无统计学意义（P〉0．05）。A组白蛋白最低在入院后12d,为（31．8±3．7）g／L;B组白蛋白最低在入院后9d,为（29．8±3．2）g／L。入院前18d,2组间差异有统计学意义（P〈0．05）。2组白蛋白指标变化趋势大致相同;B组静滴白蛋白例数明显多于A组,2组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论急性颈椎脊髓损伤后血清白蛋白迅速降低,纠正困难,气管切开加重低蛋白血症;采用静脉三升袋营养配合胃管鼻饲,鼓励自主进食,必要时静滴人血白蛋白静滴,是有效治疗方法。     

超声鉴别诊断不同类型的睾丸恶性肿瘤

目的探讨超声鉴别诊断不同类型睾丸恶性肿瘤的价值。方法回顾性分析超声和术后病理证实为睾丸恶性肿瘤患者的资料。结果90例睾丸恶性肿瘤患者中,精原细胞瘤（50例）多表现为患侧睾丸增大,内见不均匀低回声;非精原细胞性生殖细胞肿瘤（胚胎癌5例、卵黄囊瘤2例、畸胎瘤2例、混合型生殖细胞肿瘤8例）多有程度不同液化及粗大钙化;非生殖细胞肿瘤（共9例）呈形态规则、边界清晰的低回声;而淋巴瘤10例、横纹肌肉瘤2例、类癌2例未见明显特征性表现。结论不同类型睾丸恶性肿瘤的超声表现各有特点。结合患者年龄、血清肿瘤学检查对临床判断睾丸恶性肿瘤类型具有一定意义。     

双能量CT虚拟平扫图像检测泌尿系结石

[摘要]目的探讨双能量CT虚拟平扫（VNCT）检测泌尿系结石的应用价值。方法对71例泌尿系结石患者行双源CT尿路造影,依次进行普通平扫（CNCT）和动脉期、实质期常规扫描及排泄期双能量扫描。对排泄期双能量扫描图像去碘,生成VNCT图像,比较CNCT、VNCT及排泄期扫描图像对结石的显示情况,采用Kappa检验对VNCT及CNCT图像上结石大小进行一致性分析。结果在CNCT图像上共发现152个结石。以此为参考标准,VNCT图像对1-2mm结石和≥3mm结石的检出率分别为84．21％（16／19）和100％（133／133）,差异有统计学意义（X^2=14．039,P〈0．001）。排泄期图像对结石的检出率为65．13％（99／152）。与CNCT图像比较,VNCT图像上1-2mm、3-4mm和5-6mm的结石的大小一致性一般（Kappa值=0．425、0．575和0．542）,7-10mm和≥11mm结石的大小一致性好（Kappa值=0．894和0．996）。结论CT尿路造影中双能量VNCT图像可用于检测泌尿系结石,特别是≥3mm的结石。